PCR: The Polymerase Chain Reaction | Protocol ... - JoVE

聚合酶链式反应或称PCR, 是一种被广泛用来扩增DNA片段的方法。PCR要用到热循环，就是在三个被称为变性、退火和延伸的特定温度之间反复地加热和制冷。

在该步骤中，降低反应温度，使引物与目标DNA结合。通常，0.5-2分钟的孵育时间足以供引物完成退火。通过计算PCR扩增引物的熔解温度（Tm），可确定退火 ...

但是在這個溫度下，DNA聚合酶被破壞，因此在每個循環的加熱步驟後必須補充新的聚合酶。穆利斯的原始PCR反應效率極低，需要大量時間和DNA ...

PCR反应条件为温度、时间和循环次数。 温度与时间的设置：基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法，双链DNA ...